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上海研域生物大鼠ELISA試劑盒的物理吸附作用
發布時間： 2025-03-18 點擊次數： 933次上海研域生物大鼠ELISA試劑盒的包被原理主要基于抗原或抗體與固相載體之間的物理吸附作用。這一過程涉及蛋白質分子的疏水基團與聚苯乙烯固相載體表面的相互作用，從而實現抗原或抗體的固定。
包被的基本原理
ELISA試劑盒中的包被步驟是將抗原或抗體固定在固相載體（如聚苯乙烯微孔板）上。這一過程依賴于蛋白質分子的疏水基團與固相載體表面的相互作用。大分子蛋白質由于含有更多的疏水基團，更容易吸附到固相載體表面，而小分子蛋白質則需要通過與大分子蛋白結合后才能固定。
包被方法的選擇
直接吸附法：適用于大分子蛋白質（如IgG），通過物理吸附直接將抗原或抗體固定在固相載體上。
間接捕獲法：適用于小分子蛋白質或非蛋白質抗。通過預先包被特異性抗體，再利用抗原與抗體的特異性結合，提高抗原的純度和試驗的特異性。
包被條件的優化
包被效果受多種因素影響，包括抗原或抗體的濃度、包被時間、溫度、pH值以及封閉液的選擇等。例如，常用的封閉液包括BSA、牛血清或脫脂奶粉，用于填充非特異性結合位點，減少背景信號。此外，包被緩沖液的選擇也至關重要，常見的緩沖液包括碳酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液等。
包被質量的影響
包被質量直接影響ELISA試劑盒的靈敏度、特異性和重復性。理想的包被應確保固相表面盡可能多地吸附目標抗原或抗體，并且結合牢固，能夠耐受洗滌過程。
特殊包被方式
對于脂質類物質或其他難以直接吸附的抗原，可以通過溶解后加入ELISA板孔中，待酒精揮發后讓脂質自然干固在固相表面。此外，親和素-生物素系統也可用于非蛋白質抗原的包被，通過親和素與生物素之間的高親和力結合，實現抗原的均勻包被。
注意事項
包被過程中需嚴格控制抗原或抗體的濃度和包被時間，以避免過量或不足。
洗滌步驟需以去除未結合的抗原或抗體及封閉液中的雜質。
封閉步驟可采用中性緩沖溶液，以排除干擾物質的再吸附。
上海研域生物大鼠ELISA試劑盒的包被原理主要基于蛋白質與固相載體之間的物理吸附作用，通過優化包被條件和方法，可以顯著提高試劑盒的靈敏度和特異性。
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